Münster 1999 – scientific programme

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CP: Chemische Physik

CP 22: Einzelteilchenspektroskopie

CP 22.6: Talk

Thursday, March 25, 1999, 13:00–13:15, Gg

Untersuchung von Einzelmolekülreaktionen im klassischen Lichtmikroskop — •Volker Uhl, Battulga Nasanshargal, Bürk Schäfer, Helgard Gemeinhardt, Shamci Monajembashi und Karl Otto Greulich — Institut für Molekulare Biotechnologie, Beutenbergstraße 11, D-07745 Jena

Die Untersuchung von biologisch relevanten Einzelmolekülreaktionen ist schwierig unter experimentellen Bedingungen, wie sie zum Beispiel für viele Nahfeld- oder Elektronenmikroskopien benötigt werden. Wir stellen zwei Beispiele vor, wie mit klassischer, nicht-scannender Lichtmikroskopie, solche Einzelmolekülreaktionen untersucht werden können. Die Mikroinjektion von einzelnen Molekülen des Enzyms Lactatdehydrogenase in eine geeignete Substratumgebung mit hoher Viskosität führt zu diskreten Reaktionszonen. Diese können durch die Autofluoreszenz des Reaktionsprodukts NADH sichtbar gemacht werden. Unterschiede in der katalytischen Aktivität der einzelnen Enzymmoleküle können mit dieser Technik untersucht werden [1]. Als weiteres Beispiel für Einzelmolekülreaktionen wird die enzymatische Restriktion einzelner, fluoreszenzgefärbter Lambda DNS Moleküle unter mikroskopischer Sichtkontrolle durchgeführt. Die theoretisch zu erwartenden Schnittstellen können experimentell direkt am Einzelmolekül beobachtet werden.

[1] V. Uhl, G. Pilarczyk, K. O. Greulich, Biol. Chem. 379, 1185-1190 (1998)