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CP: Chemische Physik

CP 32: Poster: Einzelteilchenspektroskopie

CP 32.6: Poster

Montag, 22. März 1999, 18:00–20:00, R52/R72

Untersuchung der Kinetik enzymatisch katalysierter Einzelmolekülreaktionen mittels Mikroinjektionstechnik — •Battulga Nasanshargal, Karl Otto Greulich und Volker Uhl — Institut für Molekulare Biotechnologie e.V., Postfach 100 813, Beutenbergstraße 11, D-07745 Jena

Wir haben die Kinetik der durch einzelne Moleküle des Enzyms Lactatdehydrogenase (LDH-1) katalysierten Reaktion
Lactat + NAD⁺ ⇌ Pyruvat + NADH + H⁺
mit Hilfe einer Mikroinjektionstechnik untersucht. Dabei werden Picoliter hochverdünnter Enzymlösung in eine Substratumgebung mit erhöhter Viskosität injiziert. Die Fluoreszenzintensität des entstehenden Reaktionsprodukts NADH läßt Rückschlüsse auf die katalytische Aktivität der einzelnen Enzymmoleküle zu. Die Einflüsse der Reaktionsparameter Viskosität, pH-Wert und Ionenstärke auf die Kinetik dieser Reaktion kann auf molekularem Niveau untersucht werden. Anwendungsmöglichkeiten dieser Methode auf andere Enzymreaktionen werden vorgestellt.