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Düsseldorf 2007 – wissenschaftliches Programm

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MO: Fachverband Molekülphysik

MO 54: Poster: Electronic Spectroscopy

MO 54.1: Poster

Donnerstag, 22. März 2007, 16:30–18:30, Poster A

Photophysikalische Eigenschaften von Cyanin-Farbstoffen gebunden an Nukleinsäure — •Nils Krebs — Institut für Physik, Humboldt-Universität zu Berlin , Germany

Die Lumineszenzeigenschaften der Cyanin-Farbstoffe Thiazole Orange (TO) und NIR-667 in freier und kovalent gebundener Form an Peptidnukleinsäure (PNA) wurden mittels stationärer und zeitaufgelöster optischer Spektroskopie untersucht. Die Farbstoffe zeigen eine hohe Sensitivität der Lumineszenz: bei stark viskoser Umgebung steigt die Fluoreszenzquantenausbeute und das Fluoreszenzabklingen wird länger. Bei der gebundenen Form ist TO als synthetische 'Base' kovalent in die PNA eingebunden, NIR-667 über einen Linker an das Ende des PNA-Rückgrats. Untersuchungen wurden an mit einem und mit beiden Farbstoffen markierter PNA mit verschiedenen Basensequenzen, als Einzelstrang und nach Hybridisierung mit DNA, mit und ohne Basenfehlpaarung im Duplex, durchgeführt. Mit je nur einem Farbstoff markierte PNA zeigte nach Hybridisierung mit DNA eine Zunahme der Absorption und Fluoreszenzintensität. Letztere zeigte bei fast allen untersuchten Basensequenzen eine geringere Intensität bei Vorhandensein einer Basenfehlpaarung im Duplex. Zeigaufgelöste Messungen der TO markierten PNA ergaben ein bis zu vierfach exponentielles Fluoreszenzabklingen. Dieses wurde aufgrund der Umgebungssensitivität von TO auf die Existenz von unterschiedlichen Konformationen der PNA-DNA-Moleküle zurückgeführt. Bei der zweifach markierten PNA erfolgte der Fluoreszenz Resonanz Energie Transfer (FRET) von TO zu NIR-667.

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