Hamburg 2009 – wissenschaftliches Programm
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Q: Fachverband Quantenoptik und Photonik
Q 65: Laseranwendungen: Lebenswissenschaften
Q 65.8: Vortrag
Freitag, 6. März 2009, 15:45–16:00, VMP 8 HS
Kurzpulslaser basierte Transfektion von Suspensionszellen — •Manuel Beckschebe1, Judith Baumgart1, Heiko Meyer1, Hugo Murua Escobar2, Anaclet Ngezahayo3, Holger Lubatschowski1 und Alexander Heisterkamp1 — 1Laser Zentrum Hannover e.V., Hollerithallee 8, Hannover — 2Kleintierklinik, Tierärztliche Hochschule, Bischofsholer Damm 15, Hannover — 3Institut für Biophysik, Leibniz Universität, Herrenhäuserstr. 2, Hannover
Das Einbringen von DNA in eukaryotische Zellen wird als Transfektion bezeichnet. Für ein kurzzeitiges Öffnen der Zellmembran werden kurze Pulse im nahinfraroten Wellenlängenbereich stark auf die Membran fokussiert. Die DNA kann somit in die Zelle hinein diffundieren. Dieses Verfahren hat sich bereits als besonders schonend und effektiv herausgestellt und ist u.a. für Primär- und Stammzellen sehr gut geeignet. Für diese Methode muss allerdings jede Zelle einzeln anvisiert und manipuliert werden, so dass die Transfektion einer hinreichend großen Zellpopulation sehr zeitaufwendig ist.
Wir präsentieren einen Ansatz, um Zellen in Suspension automatisch mittels optischer Pinzette relativ zum Fokus des Kurzpulslasers zu positionieren. Dazu werden sie in einem Mikrofluidikkanal in einem Linienfokus der optischen Pinzette aufgereiht. Somit werden die Suspensionszellen im Vorbeifließen am Fokus des Kurzpulslasers transfiziert. Durch eine geeignete Kanalgeometrie können zusätzlich die transfizierten Zellen von unbehandelten getrennt werden, so dass der Anteil der erfolgreich transfizierten Zellen in dem sortierten Volumen maximiert wird.